人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆、尿液、组织匀浆、细胞上清等样本中的17-羟皮质类固醇（17-OHCS）含量。通过特异性抗体结合及酶催化显色反应，实现高灵敏度和高特异性的检测。

检测原理

固相抗体包被：微孔板预包被抗人17-OHCS抗体。

抗原-抗体结合：加入样本后，样本中的17-OHCS与固相抗体结合，再与HRP标记的检测抗体形成复合物。

显色反应：加入底物TMB，在HRP催化下生成蓝色产物，终止液酸化后转为黄色，其吸光度（OD值）与17-OHCS浓度正相关。

定量分析：通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板：48孔或96孔（规格可选）。

标准品：浓度梯度冻干品，需复溶。

检测抗体：HRP标记的抗17-OHCS抗体。

显色底物（TMB）、终止液、洗涤缓冲液等。

说明书及质控文件。

样本处理

血清/血浆：采集后离心（2000-3000 rpm，20分钟），避免溶血或脂血干扰。

尿液：建议离心后取上清，避免沉淀物影响。

组织/细胞上清：匀浆后离心取上清液。

保存条件：短期（24小时）可存于2-8℃，长期需-20℃以下冻存，避免反复冻融。

操作步骤

平衡与准备：试剂室温平衡20分钟，取出所需板条，剩余密封保存于4℃。

加样：

标准品孔：加入不同浓度标准品50 μL。

样本孔：加入待测样本50 μL。

孵育：37℃孵育30-60分钟，洗涤3次。

加检测抗体：每孔加入HRP标记抗体50 μL，重复孵育及洗涤。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟，终止后30分钟内测定OD值（450 nm）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过回归方程计算样本浓度。

若样本需稀释，最终浓度应乘以稀释倍数。

注意事项

储存条件：未开封试剂盒2-8℃保存，避免冻存或光照；开封后尽快使用。

交叉污染：使用一次性吸头，避免试剂混用。

质量控制：建议每批次检测包含空白孔、标准品及质控样本。

适用范围：仅供科研使用，不适用于临床诊断。

技术参数

检测范围：通常为0.5-200 ng/mL。

灵敏度：≤0.1 ng/mL。

批内/批间差：CV＜10%。

特异性：与人其他皮质类固醇无显著交叉反应。
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