大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液等样本中的组织蛋白去乙酰化酶（HD）含量。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），具有高灵敏度和特异性，适用于科研实验。

检测原理

试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理：

微孔板预包被抗大鼠HD抗体；

加入样本或标准品，HD与固相抗体结合；

加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物；

洗涤后加入TMB底物显色，颜色深度与HD浓度正相关；

终止反应后，450nm波长测定OD值，通过标准曲线计算样本浓度。

技术参数

检测范围：2.4–600 pg/mL。

灵敏度：<1.0 pg/mL。

特异性：不与大鼠其他相关蛋白交叉反应。

有效期：6个月（未开封，2–8℃保存）。

样本处理要求

血清/血浆：全血室温静置30分钟或4℃过夜后，2000–3000×g离心20分钟取上清，避免溶血或反复冻融。

组织匀浆：取组织块称重，加入PBS（pH 7.4）匀浆后离心取上清，分装保存于-80℃。

细胞上清：直接离心去除沉淀，上清立即检测或-20℃短期保存。

试剂盒组成

预包被微孔板

HD标准品（6浓度梯度）

HRP标记检测抗体

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

说明书及标准曲线模板

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：每孔加入样本或标准品50μL，37℃孵育30分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液洗板5次。

加酶标抗体：每孔50μL，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。

终止与检测：加终止液后30分钟内测定OD450值。

注意事项

试剂盒保存于2–8℃，使用前平衡至室温。

浓缩洗涤液若有结晶，37℃水浴溶解后使用。

不同批次试剂不可混用，避免反复冻融标准品。

实验废弃物需按生物危害规范处理。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，通过四参数拟合（4PL）计算样本浓度。
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