大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的组织多肽抗原（TPA）浓度。试剂盒包含预包被抗体、酶标抗体、校准品及配套试剂，适用于科研及临床前研究。

实验原理

固相抗体结合：微孔板预包被抗大鼠TPA抗体，加入样本或校准品后，TPA与固相抗体结合。

酶标抗体反应：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色与检测：加入底物（TMB）后，HRP催化底物显色（蓝色→黄色），450nm波长测定吸光度（OD值），OD值与TPA浓度呈正相关。

试剂盒组成

预包被微孔板（96T/48T）

TPA校准品（梯度浓度）

HRP标记检测抗体

样本稀释液、洗涤缓冲液

底物A/B、终止液（2M硫酸）

封板膜、说明书

操作步骤

样本准备：离心去除颗粒物，避免反复冻融。

加样：

标准品孔：加入50μL不同浓度校准品。

样本孔：先加10μL样本，再加40μL稀释液（空白孔仅加稀释液）。

孵育：每孔加入HRP检测抗体100μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：甩干液体，洗涤液洗板5次，拍干。

显色：每孔加底物A/B各50μL，37℃避光孵育15分钟。

终止与检测：加终止液50μL，15分钟内测定450nm OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标（X轴）、OD值为纵坐标（Y轴），绘制标准曲线（推荐四参数或对数拟合）。

样本浓度通过标准曲线计算，若样本稀释需乘以稀释倍数。

注意事项

试剂使用前平衡至室温（20-25℃），避免反复冻融。

严格控制孵育时间和温度，洗涤需彻底以减少背景干扰。

不同批次试剂盒组分不可混用。

终止液为强酸，避免接触皮肤。

技术参数

检测范围：根据校准品梯度（通常为1.56-100 ng/mL）。

灵敏度：≤0.5 ng/mL。

精密度：板内变异系数（CV）<10%，板间CV<15%。

储存与有效期

未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期12个月。

开封后：微孔板需密封防潮，4℃保存1个月内使用。
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