大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将大鼠NOS抗体预包被于酶标板，加入标准品或样本后，NOS与抗体结合，洗涤后加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。加入TMB底物显色，终止反应后于450nm测定吸光度（OD值），OD值与NOS浓度呈正相关，通过标准曲线计算样本中NOS含量。

试剂盒组成

| 组分 | 规格（96T） |

| 预包被酶标板 | 12孔×8条 |

| NOS标准品（1-6号） | 0.3mL×6管 |

| 20×浓缩洗涤液 | 25mL |

| 样本稀释液 | 6mL |

| HRP标记检测抗体 | 6mL |

| 显色剂A/B | 各6mL |

| 终止液 | 6mL |

| 封板膜、说明书 | 1份 |

标准品浓度梯度：48、24、12、6、3、1.5 μmol/L（仅供参考，需验证）

样本要求

适用样本：大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液等。

样本处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物，-20℃保存。

操作步骤

平衡：试剂盒室温平衡30分钟，预包被板开封后未用完需密封保存。

稀释：20×洗涤液用蒸馏水稀释为1×工作液。

加样：设标准品孔、样本孔、空白孔，每孔加样100μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后每孔加1×洗涤液300μL，静置30秒，重复5次。

加酶标抗体：每孔加HRP标记抗体100μL，37℃孵育30分钟。

显色：洗涤后加TMB底物A/B各50μL，避光反应15分钟。

终止：加终止液50μL，15分钟内测定OD450nm。

注意事项

实验前需校准移液器，标准曲线需做复孔。

显色液避光保存，若浓缩洗涤液析出结晶，37℃水浴溶解后使用。

不同批次试剂不得混用，避免交叉污染。

本试剂盒仅限科学研究使用，不用于临床诊断。数据解读需结合实验环境及质量控制标准。
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