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人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 人GTP酶活化蛋白ELISA试剂盒 Human GTPase activating protein, GAP Elisa Kit 产品介绍
产品参数
检测方法:双抗体夹心法(酶联免疫吸附法) 检测范围:10 pg/mL - 5000 pg/mL 最低检测限:5 pg/mL 样本类型:血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆 适应物种:人(可扩展至小鼠、大鼠等哺乳动物) 包装规格:96T(可拆分48T使用) 保存条件:2-8℃冷藏,避免冷冻;有效期6个月 用途限制:仅限科研使用,不可用于临床诊断
试剂盒组成
预包被微孔板:96孔(抗GAP抗体包被) 标准品:冻干粉2瓶(浓度梯度:0/100/500/1000/2500/5000 pg/mL) 检测抗体:生物素标记抗GAP抗体(120 μL) 酶结合物:HRP标记链霉亲和素(120 μL) 底物溶液(TMB):10 mL 终止液:2M硫酸(10 mL) 洗涤缓冲液(20×):20 mL(需稀释至500 mL) 样本稀释液:20 mL 实验步骤
样本准备: 血清/血浆:3000 rpm离心10分钟,避免溶血。 细胞上清:离心去除沉淀。 组织匀浆:PBS匀浆后离心取上清。 保存:-20℃分装,避免反复冻融。 操作流程: 平衡:试剂盒室温平衡20分钟。 加样: 标准品孔:加入50 μL不同浓度标准品。 样本孔:10 μL样本 + 40 μL稀释液。 空白孔:仅加稀释液。 孵育:37℃ 60分钟,洗板5次。 加检测抗体:每孔100 μL,37℃ 30分钟,洗板5次。 加酶结合物:每孔100 μL,37℃ 30分钟,洗板5次。 显色:每孔加TMB底物50 μL,避光孵育15分钟。 终止:每孔加终止液50 μL,450 nm测OD值。 注意事项
质量控制: 标准曲线R²需≥0.99,否则需重复实验。 复孔CV值应<15%。 干扰因素: 避免样本中脂血、溶血或细菌污染。 高浓度样本需稀释后复测。 其他: 不同批次试剂不可混用。 终止后15分钟内完成读数。 所需仪器 酶标仪(450 nm滤光片) 精密移液器(10-1000 μL)及无菌吸头 37℃恒温箱或水浴锅 洗板机或手动洗瓶 公司正在出售的产品
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上海谷研实业有限公司
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