大鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被抗大鼠ICA抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记检测抗体，经温育洗涤后，TMB底物显色。颜色深度与样本中ICA浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值并计算浓度。

样本要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清，-20℃保存避免反复冻融。

血浆：EDTA/肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清检测或冻存。

其他样本：细胞上清、脑脊液等需明确稳定性，避免溶血或脂血干扰。

操作步骤

试剂准备：使用前室温平衡20分钟，浓缩洗涤液水浴溶解结晶。

加样：按标准曲线（0-5号梯度）及样本顺序加入微孔，避免交叉污染。

温育：37℃避光反应，严格遵循说明书时间（通常30-60分钟）。

洗涤：洗板5次，拍干残留液体。

显色：加入TMB底物，避光显色15分钟，终止后30分钟内检测。

注意事项

试剂盒2-8℃保存，有效期6个月；未用板条需密封防潮。

标准品S0为阴性对照，样本浓度需乘以稀释倍数（如5倍）。

操作时佩戴防护用具，避免接触终止液（含酸性物质）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，拟合方程计算样本浓度。

适用范围

仅供科研使用，不可用于临床诊断。
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