大鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体一步夹心法ELISA技术。预先包被大鼠IAA捕获抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记检测抗体，经温育洗涤后，通过TMB底物显色（蓝色→黄色），颜色深度与样本中IAA浓度呈正相关。450nm波长下测定OD值，计算浓度。

样本要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清，-20℃/-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：EDTA/肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清检测或保存。

技术参数（参考小鼠数据）

检测范围：0.312-20 pg/mL（实际以大鼠试剂盒标注为准）

灵敏度：≤0.15 pg/mL

特异性：与相关蛋白无交叉反应

重复性：板内/板间变异系数<10%

操作步骤

加样：依次加入标准品、样本、检测抗体至微孔。

温育：37℃孵育60分钟，彻底洗涤。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。

终止：加入终止液，颜色转为黄色。

检测：450nm酶标仪读取OD值。

洗涤方法

自动洗板机：每孔350μl洗涤液，洗5次，吸液间隔60秒。

手动洗涤：拍干后加350μl洗涤液浸泡1-2分钟，重复5次。

保存与运输

低温运输，2-8℃短期保存，长期建议-20℃（避免反复冻融）。

注意事项

仅限科研使用，不用于临床诊断。

不同批次试剂不可混用。

避免底物接触金属或氧化剂。
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