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大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶ELISA试剂盒 Rat AngiotensinⅠConverting Enzyme, ACEⅠElisa Kit 产品介绍
大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒 产品概述
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆或相关液体样本中血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)的浓度。通过预包被的捕获抗体与样本中ACEⅠ结合,经生物素标记抗体和酶复合物反应后显色,最终通过450nm波长测定吸光度(OD值),计算目标物浓度。 实验原理
包被抗体:微孔板预包被大鼠ACEⅠ特异性捕获抗体。 样本孵育:加入样本或标准品,目标ACEⅠ与捕获抗体结合。 检测抗体:加入生物素标记的检测抗体,形成抗体-抗原-抗体复合物。 酶联反应:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,与生物素结合。 显色与终止:TMB底物在HRP催化下显蓝色,终止液转化为黄色,OD值与ACEⅠ浓度成正比。 样本处理要求
血清:全血室温静置2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟,取上清;-20℃保存时避免反复冻融。 血浆:EDTA或肝素抗凝,采集后30分钟内2-8℃离心(1000×g,15分钟),取上清检测或冻存。 其他样本:组织匀浆需离心取上清,细胞培养液需去除颗粒物。 试剂盒组成
预包被微孔板 ACEⅠ标准品(浓度梯度) 生物素标记检测抗体 HRP标记链霉亲和素 TMB显色液、终止液 洗涤缓冲液(浓缩液) 说明书及标准曲线模板 操作步骤
标准品与样本加样:每孔加入标准品或样本100μL,37℃孵育60分钟。 洗涤:弃液后加洗涤液,重复3次。 检测抗体孵育:每孔加生物素标记抗体50μL,37℃孵育30分钟,洗涤。 酶复合物反应:加HRP标记物50μL,37℃避光孵育30分钟,洗涤。 显色与检测:加TMB 90μL,37℃避光显色15分钟,终止后30分钟内测定OD450nm。 注意事项
试剂使用前需平衡至室温,避免反复冻融。 不同批次试剂不可混用,标准品需现配现用。 显色时间需严格控制,终止后颜色稳定性约30分钟。 技术参数 检测范围:1.56–100 ng/mL(具体以标准曲线为准) 灵敏度:≤0.5 ng/mL 精密度:板内变异系数<10%,板间<15% 保存条件:4℃密封保存,有效期6个月
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上海谷研实业有限公司
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