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人αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 人αL岩藻糖苷酶ELISA试剂盒 Human alpha-L-fucosidase, AFU Elisa Kit 产品介绍
预期用途
本试剂盒采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测人血清、血浆或其他生物液体中αL岩藻糖苷酶(AFU)的含量,适用于科研用途,不用于临床诊断。
实验原理
双抗体夹心法: 微孔板预包被纯化AFU抗体形成固相载体。 加入待测样本或标准品后,AFU与固相抗体结合,再依次加入生物素化抗体、HRP标记亲和素,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。 洗涤后加入底物TMB显色,在过氧化物酶催化下生成蓝色产物,酸化后转为黄色。 颜色深度与样本中AFU浓度正相关,通过450nm波长测定OD值,依据标准曲线计算浓度。 检测样本类型: 血清、血浆、尿液、脑脊液、细胞裂解液或固体组织匀浆(需预处理)。 试剂盒组成
96孔酶标板:预包被AFU抗体的微孔板(12孔×8条)。 标准品(冻干粉):2瓶(100 U/L),临用前以稀释液复溶,梯度稀释为100 U/L至1.56 U/L系列浓度。 其他组分: 30倍浓缩洗涤液(20mL×1瓶) 酶标试剂(6mL×1瓶,HRP标记) 样品稀释液(6mL×1瓶) 显色剂A液/B液(各6mL×1瓶) 终止液(6mL×1瓶) 操作步骤
标准品配制:复溶后梯度稀释,避免孔内直接稀释。 加样:每孔依次加入样本或标准品(50μL)、生物素化抗体(50μL),37℃孵育60分钟。 洗涤:弃液后以洗涤液注满各孔,静置30秒后甩干,重复5次。 显色:加入TMB底物(100μL/孔),避光反应15分钟。 终止与检测:加入终止液(50μL/孔),15分钟内测定450nm OD值。 注意事项
避免反复冻融样本或标准品。 不同批次试剂不可混用。 显色时间需严格控制,避免过度反应。 废弃液体需按生物危害物处理。 结果计算 以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线,通过四参数拟合(4PL)计算样本浓度。 技术参数 检测范围:1.56–100 U/L 灵敏度:≤0.5 U/L 批内/批间变异系数:<10% 公司正在出售的产品
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上海谷研实业有限公司
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