产品基本信息

| 检测方法 | 双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA） |

| 适用样本 | 血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆液 |

| 检测范围 | 0.625-40 ng/mL |

| 灵敏度 | ≤0.25 ng/mL |

| 检测时长 | 约3小时（含孵育步骤） |

| 保存条件 | 2-8℃ 避光保存（复溶组分按标签指示）|

| 有效期 | 12个月 |

检测原理

采用双抗体夹心ELISA法：

预包被抗人α-GST单克隆抗体于微孔板。

加入样本/标准品，α-GST与包被抗体结合。

加入生物素标记检测抗体，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

添加辣根过氧化物酶（HRP）标记链霉亲和素，与生物素结合。

加入TMB底物显色，颜色深度与样本中α-GST浓度成正比。

试剂盒组分

（96孔示例）

| 组分 | 规格 | 数量 |

| 预包被微孔板 | 96孔 | 1板 |

| α-GST标准品 | 40 ng/mL | 1瓶 |

| 生物素标记检测抗体 | 1:100浓缩液 | 1支 |

| HRP-链霉亲和素结合物 | 1:100浓缩液 | 1支 |

| TMB底物溶液 | 无浓缩 | 1瓶 |

| 终止液（2M H₂SO₄） | - | 1瓶 |

| 洗涤缓冲液（20×） | 20mL | 1瓶 |

| 样本稀释液 | 10mL | 1瓶 |

| 封板膜 | - | 4张 |

样本处理要求

| 样本类型 | 前处理指南 |

| 血清/血浆 | 使用EDTA或肝素抗凝，离心10,000×g 15分钟去除颗粒物，避免溶血 |

| 细胞上清 | 离心去除沉淀，直接检测或-80℃分装保存 |

| 组织匀浆 | 按重量比1:9加入PBS匀浆，离心取上清 |

注意事项：

样本需在采集后24小时内检测或-80℃冻存（避免反复冻融）。

高脂血症样本可能导致假阳性，建议稀释后重测。

操作步骤

标准品稀释：用样本稀释液将标准品按梯度稀释为40、20、10、5、2.5、1.25、0.625 ng/mL（零标准孔为稀释液）。

加样：每孔加100μL样本或标准品，37℃孵育60分钟。

洗板：弃液后用洗涤液（1×）洗孔5次，拍干。

加检测抗体：每孔加100μL生物素化抗体（1:100稀释），37℃孵育60分钟。

加酶结合物：洗板后每孔加100μL HRP-链霉亲和素（1:100稀释），37℃避光孵育30分钟。

显色：洗板后加TMB底物90μL/孔，避光显色15分钟。

终止反应：加50μL终止液，颜色由蓝变黄。

检测：30分钟内于450nm波长读取吸光度（OD值），参考波长630nm。

结果计算

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标（log刻度），OD450值为纵坐标（线性刻度）。

样本浓度通过标准曲线方程（四参数拟合）自动计算。

正常参考区间（供参考）：

血清α-GST：健康成人通常 <5 ng/mL

注：实验室应建立自己的参考范围。

性能参数

| 指标 | 结果 |

| 精密度 | 板内CV <8%，板间CV <10% |

| 回收率 | 85%-115% |

| 特异性 | 不与GST π、GST μ等亚型交叉反应 |

| 干扰物质 | 胆红素≤20 mg/dL、血红蛋白≤500 mg/dL无显著干扰 |

注意事项

临床诊断限制：本产品仅用于科研，临床诊断需获得当地监管批准。

操作规范：所有试剂使用前需平衡至室温（20-25℃），避免反复冻融浓缩液。

安全提示：终止液含强酸，需穿戴防护装备操作。

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