大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、尿液或其他生物液体中的游离脂肪酸（FFA）含量，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，具有高灵敏度和特异性。FFA是中性脂肪分解产物，在能量代谢（如持久运动）中起关键作用，其血浆水平与代谢性疾病（如糖尿病、肥胖）密切相关。

检测原理

采用双抗体夹心法：

微孔板预包被抗大鼠FFA抗体，捕获样本中的FFA。

加入生物素化检测抗体与FFA结合，形成抗体-抗原-抗体复合物。

通过辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素催化底物TMB显色，颜色深浅与FFA浓度正相关。

在450 nm波长下测定吸光度（OD值），根据标准曲线计算样本浓度。

技术参数

检测范围：7.8–500 ng/mL

最低检测限：1.95 ng/mL

特异性：不与大鼠其他相关蛋白交叉反应。

有效期：6个月（未开封，-20℃保存）。

试剂盒组成

预包被酶联板（96孔）

FFA标准品（冻干粉，2瓶）

样本稀释液（20 mL）

生物素标记抗体（10 mL）

HRP标记亲和素（10 mL）

洗涤缓冲液（浓缩液，需稀释）

TMB底物溶液、终止液

样本要求

样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、尿液、组织匀浆上清液。

处理要求：

避免使用含叠氮钠（NaN₃）的防腐剂。

离心去除颗粒或溶血，-20℃保存，避免反复冻融。

操作步骤

标准品复溶：用稀释液溶解冻干标准品，梯度稀释。

加样：每孔加入标准品或样本（100 μL），设空白孔。

孵育：37℃孵育90分钟，洗板5次。

加检测抗体：每孔加入生物素化抗体（100 μL），37℃孵育60分钟，洗板。

加酶结合物：加入HRP标记亲和素（100 μL），37℃避光孵育30分钟，洗板。

显色：加入TMB底物（90 μL），避光反应15–30分钟。

终止：加入终止液（50 μL），立即测定OD值。

注意事项

实验前平衡所有试剂至室温（20–25℃）。

洗涤时需彻底，避免交叉污染（更换吸头）。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

不同批号试剂不可混用。

应用领域

代谢疾病研究（如胰岛素抵抗、肥胖）。

心血管疾病机制探索（FFA与内皮功能）。

药物开发（降脂药物疗效评估）。

储存条件

未开封试剂盒：-20℃保存，避免反复冻融。

频繁使用时，可短期存放于2–8℃（≤1个月）。
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