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大鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 大鼠载脂蛋白EELISA试剂盒 Rat Apolipoprotein E, Apo-E Elisa Kit 产品介绍
大鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒 检测原理
采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA): 预包被抗大鼠Apo-E单克隆抗体于微孔板 加入样本或标准品,Apo-E与捕获抗体结合 加入生物素化检测抗体,形成“抗体-抗原-抗体”复合物 添加链霉亲和素-HRP偶联物,结合生物素化抗体 加入TMB显色底物,催化产生蓝色产物 终止液终止反应,黄色深浅与Apo-E浓度正相关 检测范围 0.156 ng/mL - 10 ng/mL(高灵敏度版本可扩展至0.078 ng/mL) 样本类型 血清、血浆(肝素/EDTA抗凝) 脑脊液、组织匀浆液(需离心预处理) 细胞培养上清 注意:避免溶血、脂血样本,样本建议-80°C长期保存,避免反复冻融。 试剂盒组成
| 组分 | 规格 | 储存条件 | | 预包被微孔板 | 96孔(12条×8孔) | 2-8°C干燥保存 | | 大鼠Apo-E标准品 | 冻干粉×2支 | -20°C避光 | | 样本稀释液 | 30 mL | 2-8°C | | 生物素化检测抗体 | 1.2 mL | -20°C | | 链霉亲和素-HRP结合物 | 1.2 mL | -20°C避光 | | TMB显色底物 | 15 mL | 2-8°C避光 | | 终止液(2M H₂SO₄) | 15 mL | 2-8°C | | 20×洗涤缓冲液(浓缩液) | 50 mL | 2-8°C | | 封板膜 | 4张 | 室温 | 操作步骤
标准品重建:用1mL稀释液溶解冻干标准品,梯度稀释7个浓度 加样:每孔加入100μL标准品或样本(复孔实验) 孵育:37°C温育90分钟 洗板:用1×洗涤液洗板4次 加检测抗体:每孔100μL生物素化抗体,37°C孵育60分钟 加酶结合物:每孔100μL HRP-链霉亲和素,37°C孵育30分钟 显色:每孔90μL TMB,避光室温显色15分钟 终止:每孔50μL终止液,450nm波长读取OD值 计算结果 绘制标准曲线:以标准品浓度为横轴,OD₄₅₀nm值为纵轴(拟合4-参数逻辑曲线) 样本浓度 = 曲线对应值 × 稀释倍数 性能参数
精密度:板内变异系数(CV) < 8%,板间CV < 10% 回收率:血清样本85%-115% 特异性:不与大鼠Apo-A1、Apo-B等交叉反应 灵敏度:最低检出限(LOD) 0.05 ng/mL 注意事项
实验全程戴手套,避免酶标板污染 TMB与终止液有腐蚀性,避免接触皮肤 不同批次试剂组分不可混用 样本中勿添加叠氮钠(抑制HRP活性)
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上海谷研实业有限公司
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