大鼠孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆等样本中的孕酮受体（PGR）含量，采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），具有高灵敏度和特异性，适用于科研实验，不用于临床诊断。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被大鼠PGR特异性捕获抗体。

样本反应：依次加入待测样本、标准品及HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入TMB底物后，在过氧化物酶催化下显蓝色，酸性终止液转化为黄色，颜色深度与样本中PGR浓度正相关。

检测：450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃/-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清检测或保存。

组织匀浆：

PBS（0.01M, pH7.4）冲洗组织，去除血液；

按1:9（重量:体积）加入含蛋白酶抑制剂的PBS，冰上研磨；

超声破碎或冻融后，5000×g离心5-10分钟，取上清。

其他样本：细胞上清液等需1000×g离心20分钟，取上清。

注意：溶血样本可能干扰结果，需避免使用。

试剂盒组成

| 组分 | 96T配置 | 48T配置 |

| 微孔酶标板 | 8孔×12条 | 8孔×6条 |

| 标准品 | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 |

| 检测抗体-HRP | 6mL | 3mL |

| 样本稀释液 | 6mL | 3mL |

| TMB底物 | 10mL | 5mL |

| 终止液 | 10mL | 5mL |

| 洗涤液（20×） | 30mL | 15mL |

操作步骤

准备：将试剂平衡至室温（20-25℃），配制洗涤液（1×）。

加样：每孔依次加入标准品或样本50μL、检测抗体50μL，轻轻混匀，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后每孔加满洗涤液，静置30秒，重复5次。

显色：每孔加TMB底物90μL，37℃避光孵育15-20分钟（观察颜色变化，适时终止）。

终止：每孔加终止液50μL，立即测定OD450nm。

结果计算

以标准品浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标，绘制标准曲线。

推荐使用专业软件（如Curve Expert 1.3）拟合曲线，计算样本浓度。

注意事项

储存：未开封试剂盒2-8℃保存，有效期6个月；开封后微孔板需密封防潮。

重复性：同一样本需复孔检测，CV值应≤15%。

安全：终止液含酸，避免接触皮肤；废弃液体需按生物危害处理。

技术参数

检测范围：1.0-100 ng/mL（具体以标准曲线为准）。

灵敏度：<0.1 ng/mL。

特异性：不与大鼠其他蛋白交叉反应。

检测时间：约2.5小时（含孵育步骤）。
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