大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法。预包被抗BrdU抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记检测抗体，经温育洗涤后，加入底物TMB显色。颜色的深浅与样本中BrdU浓度呈正相关，通过450nm波长测定OD值并计算浓度。

检测方法：双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）

适用种属：大鼠（兼容人、小鼠、豚鼠等）

检测样本：血清、血浆、尿液、组织匀浆、细胞培养上清等液体样本。

试剂盒组成

| 组分名称 | 96孔配置 | 48孔配置 |

| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 |

| 标准品 | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 |

| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL |

| 洗涤缓冲液（20×）| 25mL | 15mL |

| 底物A/B | 各6mL | 各3mL |

| 终止液 | 6mL | 3mL |

自备器材

酶标仪（450nm滤光片）

精密移液器及枪头（0.5-1000μL范围）

37℃恒温箱

蒸馏水或去离子水（用于稀释洗涤液）

操作步骤

样本处理：

血清/血浆：室温静置10-20分钟，2000-3000rpm离心20分钟，收集上清。

组织匀浆：按质量体积比1:9加入PBS匀浆，离心取上清。

试剂准备：20×洗涤缓冲液按1:19稀释为工作浓度。

加样与温育：

每孔依次加入标准品或样本50μL、检测抗体-HRP50μL，37℃孵育60分钟。

洗涤5次，拍干后加入底物A/B各50μL，避光显色15分钟。

终止与检测：加入终止液50μL，15分钟内测定OD值。

注意事项

保存条件：2-8℃避光保存，有效期6个月。使用前需室温平衡20分钟。

样本稀释：若说明书标注样本已稀释，最终浓度需乘以稀释倍数。

质量控制：S0标准品作为阴性对照，显色异常需重复实验。

禁止用途：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。
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