| 应用物种 | Rat (大鼠) |

| 检测靶标 | Aquaporin-3 (AQP-3) |

| 检测方法 | 双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA） |

| 适用样本类型 | 血清、血浆、组织匀浆液、细胞裂解液、尿液*（注：需预处理） |

| 检测范围 | 15.6 pg/mL - 1000 pg/mL |

| 灵敏度 | < 5.0 pg/mL |

| 规格 | 96孔板（可拆分为8孔×12条） |

| 保存条件 | 2-8℃避光保存（切勿冷冻） |

| 有效期 | 6-12个月（详见外包装） |

试剂盒组分（96T规格示例）

| 组分名称 | 数量/体积 | 保存条件 |

| 预包被抗大鼠AQP-3抗体的微孔板 | 1 × 96孔 | 2-8℃（干燥） |

| 大鼠AQP-3标准品 | 2管（冻干粉） | -20℃ |

| 标准品稀释液 | 1 × 20mL | 2-8℃ |

| 生物素化检测抗体（100×） | 1 × 120µL | -20℃ |

| 辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（100×） | 1 × 120µL | -20℃ |

| 样本稀释液 | 1 × 30mL | 2-8℃ |

| 洗涤缓冲液（25×） | 1 × 30mL | 室温/2-8℃ |

| TMB显色底物溶液 | 1 × 11mL | 2-8℃（避光） |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 1 × 11mL | 室温 |

| 封板膜 | 4张 | 室温 |

| 说明书 | 1份 | — |

所需但未提供的器材和试剂

酶标仪（450nm波长）

微量移液器（10μL, 100μL, 1000μL）及吸头

洗板机或手动洗板装置

37℃恒温培养箱

双蒸水或去离子水

离心机（用于样本制备）

样本前处理

血清/血浆：采集后2小时内离心（3000 rpm，15分钟），分装后冻于-20℃或-80℃。

组织匀浆液：取组织于PBS中匀浆→离心（5000×g，5分钟）→取上清分装冻存。

细胞裂解液：收集细胞→裂解→离心（15000×g，10分钟）→取上清检测。

尿液：离心（3000 rpm，15分钟）去除沉淀，上清需适当稀释后检测。

检测步骤

配制试剂：

标准品复溶：加标准品稀释液→梯度稀释（1000, 500, 250, 125, 62.5, 31.25, 15.6 pg/mL）和零孔（0 pg/mL）。

配制工作液：生物素化抗体（1:100稀释）、酶结合物（1:100稀释）。

配制洗涤液：1× PBS-T（25×浓缩液+蒸馏水）。

加样与孵育（37℃）：

加标准品/样本（100μL/孔）→ 封板 → 孵育90分钟。

弃液 → 洗板3次。

加生物素化检测抗体（100μL/孔）→ 孵育60分钟。

弃液 → 洗板3次。

加酶结合物（100μL/孔）→ 孵育30分钟（避光）。

弃液 → 洗板5次。

显色与终止：

加TMB底物（90μL/孔）→ 室温避光显色15-30分钟（观察颜色变化）。

加终止液（50μL/孔）→ 轻轻混匀。

读值：

30分钟内于酶标仪450nm处测OD值（建议双波长校正：630nm）。

结果计算

计算标准品平均OD值 → 绘制标准曲线（浓度-log值，OD值-线性）。

根据样本OD值，在曲线中插值得AQP-3浓度。

稀释样本需乘以稀释倍数（如尿液稀释10倍，结果×10）。

注意事项

关键操作提示

避免反复冻融样本或试剂（分装保存）。

孵育时确保微孔板完全封闭并避免振动。

TMB对光敏感，显色过程需严格避光。

终止液含强酸，避免接触皮肤。

公司正在出售的产品