大鼠甲状旁腺激素(PTH) ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）：

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠PTH抗体。

样本反应：加入待测样本（血清、血浆、组织匀浆等），PTH与固相抗体结合。

酶标抗体：加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入TMB底物，在HRP催化下显蓝色，终止后转为黄色。

定量分析：450nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算PTH浓度。

主要组分

预包被微孔板：96孔或48孔（根据规格）。

标准品：冻干粉，需按说明书复溶。

样本稀释液：20mL/瓶。

酶标抗体：HRP标记的抗大鼠PTH抗体（120μL/瓶）。

洗涤缓冲液：20mL浓缩液，需按1:25稀释。

TMB底物溶液：10mL/瓶。

终止液：2N硫酸（10mL/瓶）。

样本要求

适用样本：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清液、组织匀浆。

样本处理：

血清/血浆：离心去除颗粒物，避免反复冻融。

组织匀浆：需用PBS或裂解液制备，离心取上清。

保存：短期（24小时）可置于4℃，长期需-20℃以下冻存。

操作步骤

标准品稀释：按梯度稀释至所需浓度。

加样：每孔加入标准品或样本（100μL），37℃孵育1小时。

洗涤：弃液体，洗涤液洗板3次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体（100μL），37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB底物（100μL），避光反应15分钟。

终止：加入终止液（50μL），立即测定OD值。

注意事项

仅限科研：不可用于临床诊断或治疗。

批次差异：不同批次的检测限或灵敏度可能存在差异，需以实际说明书为准。

配套试剂：禁止混用其他试剂，避免交叉污染。

实验环境：温度、湿度及操作规范可能影响结果，建议重复测定。

样本备份：建议预留充足样本以应对实验误差。
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