大鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被大鼠TG特异性抗体的微孔板中，依次加入样本、标准品及HRP标记检测抗体，经温育洗涤后，通过TMB底物显色（蓝色→黄色），颜色深度与样本中TG浓度正相关。450nm波长下测定OD值，计算浓度。

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清，-20℃/-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：EDTA/肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清检测或冻存。

其他样本（如组织匀浆）：需匀浆后3000×g离心10分钟取上清。

技术参数

检测范围：0.31-20 ng/ml。

灵敏度：≤0.2 ng/ml（典型值）。

有效期：6个月（4℃储存，避免反复冻融标准品）。

操作步骤

平衡试剂：从冷藏环境中取出后需室温平衡15-30分钟。

加样：使用加样器精确加入样本、标准品及检测抗体，建议复孔检测。

温育：按说明书要求时间及温度孵育（通常37℃）。

洗涤：彻底洗涤未结合物质，避免残留。

显色与终止：加入TMB显色，适时加入终止液。

读数：450 nm波长下测定OD值，绘制标准曲线计算浓度。

注意事项

实验前需平衡所有组分至室温。

避免孔间交叉污染，严格按洗涤步骤操作。

建议复孔检测以提高准确性。

储存条件

试剂盒未开封前需4℃保存；标准品及检测抗体分装后-20℃冻存。
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