大鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中碱性成纤维生长因子（bFGF）的含量，适用于科研实验，不可用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心法（ELISA）：

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠bFGF捕获抗体。

抗原结合：加入样本后，bFGF与固相抗体结合。

酶标抗体：加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

显色反应：洗涤后加入TMB底物，在HRP催化下显蓝色，终止后转为黄色。

定量分析：450 nm波长测定OD值，通过标准曲线计算样本中bFGF浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

标准品（浓度梯度）

检测抗体（HRP标记）

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液）

封板膜、说明书

样本要求

类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、组织匀浆、细胞上清液。

处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物，-20℃或-80℃保存。

操作步骤

加样：标准品及样本加入对应孔（建议复孔）。

温育：37℃孵育1小时，洗涤3次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟，洗涤。

显色：加入TMB，避光反应15分钟。

终止：加入终止液，颜色转为黄色。

检测：30分钟内于450 nm读取OD值。

注意事项

保存条件：2-8℃保存，有效期6个月。

避免污染：使用一次性吸头，避免交叉污染。

温育控制：确保温度稳定，避免强光直射。

标准曲线：每次实验需重新绘制。

技术参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL。

灵敏度：<5 pg/mL。

批内/批间差：CV<10%。

特异性：不与大鼠其他生长因子交叉反应。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标，拟合四参数曲线，计算样本浓度。
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