大鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用比色法原理，基于酶促反应测定甘油三酯含量。其核心步骤通常包含：

脂解： 样本中的甘油三酯（TG）在特异性脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用下，水解为甘油和游离脂肪酸（FFA）。

甘油激酶反应： 释放的甘油在甘油激酶（GK）和ATP的作用下，生成甘油-3-磷酸（G-3-P）和ADP。

甘油磷酸氧化酶反应： G-3-P在甘油磷酸氧化酶（GPO）的作用下，被氧化生成过氧化氢（H₂O₂）和二羟丙酮磷酸（DHAP）。

过氧化物酶显色反应： 生成的H₂O₂在过氧化物酶（POD）存在下，与4-氨基安替比林（4-AAP）和特定的色原（如TOOS或N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺，EHSPT）发生氧化偶联反应，生成稳定的醌亚胺类红色染料。

比色测定： 该红色染料在特定波长（通常为500-550 nm，如505 nm或546 nm）处有最大光吸收。其颜色的深浅（吸光度值OD）与样本中甘油三酯的含量成正比。通过标准曲线即可计算出样本中TG的浓度。

试剂盒组成

| 组分名称 | 规格/数量 | 储存条件 | 备注 |

| TG酶工作液 | 1瓶 (XX ml) | 2-8°C | 包含脂蛋白脂肪酶(LPL)、甘油激酶(GK)、甘油磷酸氧化酶(GPO)、过氧化物酶(POD)、ATP、4-AAP、色原等。使用前请平衡至室温，轻轻混匀，避免产生气泡。 |

| TG标准品 (冻干粉或溶液) | 1套 (X瓶) | 2-8°C | 通常包含6-7个梯度浓度点 (如 0, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0, 8.0 mmol/L)。使用前请严格按照说明书要求复溶/稀释。 |

| 样本稀释液 | 1瓶 (XX ml) | 2-8°C | 用于稀释高浓度样本。 |

| 阳性对照 | 1瓶 (XX μl) | 2-8°C | 已知浓度的TG样本，用于监控实验系统有效性。 |

| 阴性对照 | 1瓶 (XX μl) | 2-8°C | 通常为生理盐水或缓冲液。 |

| 96孔微孔板 | 1块 (12条×8孔) | 2-8°C (干燥) | 预包被或空白板（取决于具体试剂盒设计）。 |

| 封板膜 | 3-4张 | 室温 | 用于孵育时覆盖微孔板。 |

| 说明书 | 1份 | 室温 | |

样本收集与处理

样本类型： 大鼠血清、血浆（推荐EDTA或肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆液（需离心取上清）。

采集：

血清/血浆：按标准动物采血程序操作，避免溶血。血液室温静置30分钟或4°C过夜凝固后，3000 rpm离心10-15分钟，小心吸取上清（血清）。血浆需在采血后立即加入抗凝剂并混匀，离心分离血浆。

细胞上清：离心去除细胞碎片。

组织匀浆：将组织剪碎，按重量体积比（如1:9）加入预冷的生理盐水或PBS，冰浴下充分匀浆。4°C, 3000-5000 rpm离心10-15分钟，取上清液检测。

储存：

新鲜样本在2-8°C下可稳定保存数日。

如需长期保存，建议分装后于-20°C或-80°C冻存。避免反复冻融（通常≤3次）。冻存样本检测前需在4°C缓慢解冻，并充分混匀。

稀释： 如果预计样本TG浓度高于试剂盒最高标准点，需用样本稀释液进行适当稀释。计算浓度时需乘以稀释倍数。
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