大鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被大鼠HL特异性捕获抗体的微孔板中，依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，通过TMB底物显色。显色强度与样本中HL浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值并计算浓度。

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清，-20℃/-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：EDTA或肝素抗凝采集，30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟，上清检测或冻存（同上）。

其他样本（参考建议）：

细胞上清液：3000×g离心10分钟去除颗粒；

组织匀浆：生理盐水匀浆后离心取上清。

操作步骤

加样：每孔加入50μL标准品或待测样本。

孵育：立即加入50μL生物素化抗体工作液，37℃孵育45分钟。

洗涤：弃液后使用1×洗涤缓冲液洗板3次。

酶结合物反应：每孔加入100μL HRP工作液，37℃孵育30分钟。

洗涤：重复洗涤5次。

显色：加入90μL底物溶液，37℃避光孵育15分钟。

终止与检测：加入50μL终止液，立即于450nm波长测定吸光度（OD值）。

注意事项

不同样本类型可能存在**离心条件差异，建议预实验验证；

冻存样本需分装保存，避免反复冻融；

实际操作以试剂盒内附说明书为准。
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