大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用于定量检测大鼠血清、血浆或组织液中的孤腓肽(OFQ/N)浓度。其原理基于特异性抗体与目标蛋白的结合，通过酶催化显色反应实现信号放大，最终通过吸光度（OD值）计算样品浓度。

检测原理

包被抗体固定：微孔板预包被抗大鼠OFQ/N捕获抗体。

样本孵育：依次加入待测样本或标准品，随后加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB，在过氧化物酶催化下生成蓝色产物，酸化后转为黄色，颜色深度与OFQ/N浓度正相关。

结果测定：于450 nm波长测定OD值，通过标准曲线计算样本浓度。

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜后，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃离心（1000×g，15分钟），取上清检测或冷冻保存。

其他样本（如组织液、细胞上清液）：需离心去除颗粒物，澄清液体直接检测或分装冻存。

试剂盒组分

预包被抗体的微孔板（48T/96T可选）。

OFQ/N标准品系列（浓度梯度）。

HRP标记检测抗体。

TMB显色底物、终止液。

洗涤缓冲液、样本稀释液。

阴性/阳性对照品（部分规格含）。

操作步骤

标准品与样本准备：按说明书稀释标准品，样本需预处理（如离心）。

加样与孵育：每孔加入标准品或样本100 μL，37℃孵育60分钟，洗涤3次。

酶标抗体孵育：加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟，洗涤3次。

显色与终止：每孔加入TMB底物100 μL，避光反应15分钟，加终止液50 μL。

读数：450 nm处测定OD值，绘制标准曲线并计算样本浓度。

注意事项

储存条件：未开封试剂盒2-8℃保存，有效期6个月；开封后组分按标签要求存放。

重复冻融：样本分装保存，避免反复冻融影响稳定性。

交叉污染：更换吸头避免交叉污染，洗涤需彻底。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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