大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆等样本中的甘丙肽/甘丙素（GAL）含量，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），具有高灵敏度、高特异性和稳定性。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠GAL抗体。

样本结合：加入样本或标准品，GAL与包被抗体结合。

检测抗体：加入生物素化抗大鼠GAL抗体及辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成复合物。

显色反应：加入TMB底物，在HRP催化下显蓝色，终止后转为黄色。

定量分析：450 nm波长测定OD值，通过标准曲线计算GAL浓度。

样本处理

血清/血浆：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清于-20℃/-80℃保存，避免反复冻融。

其他样本：组织匀浆需离心取上清；细胞培养上清可直接检测。

试剂盒组成

预包被微孔板

GAL标准品

生物素化检测抗体

HRP标记亲和素

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：每孔加入样本或标准品50 μL，随后加入检测抗体50 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，重复5次。

显色：每孔加TMB 100 μL，避光孵育15分钟。

终止与检测：加终止液50 μL，立即测定450 nm OD值。

注意事项

保存条件：未开封试剂盒-20℃保存；开封后2-8℃存放，避免反复冻融。

洗涤液：浓缩液可能出现盐析，37℃水浴助溶后使用。

板孔现象：新拆封板孔可能存在少量水汽，不影响实验结果。

结果计算：以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，拟合方程计算样本浓度。

性能参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL（具体以实际标准曲线为准）。

灵敏度：<5 pg/mL。

特异性：不与大鼠其他神经肽交叉反应。
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