样本类型

适用于大鼠血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、关节液等生物液体。

保存与运输

保存条件：2-8℃低温避光保存，保质期6个月。

运输：全国包邮，需确保冷链运输。

检测原理与方法

原理：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。

步骤：

预包被抗大鼠IgA抗体的微孔板中依次加入标准品和样本。

加入生物素标记的二抗与HRP标记的链霉亲和素形成复合物。

洗涤后加入显色底物TMB，在450 nm波长下测定吸光度（OD值）。

通过标准曲线计算样本中IgA浓度。

实验注意事项

样本处理：

血清/血浆需离心分离，避免溶血；组织样本需匀浆后离心取上清。

解冻后需充分混匀，避免反复冻融。

试剂准备：

使用前需平衡至室温（约30分钟）。

严格按照说明书稀释标准品和样本。

质量控制：

建议每板设置复孔和空白对照。

板内变异系数≤9%，板间≤11%。

结果计算

绘制标准曲线：以标准品浓度（X）为横坐标，OD值（Y）为纵坐标拟合4-参数曲线。

根据样本OD值计算IgE浓度（ng/mL）。

公式示例：

浓度 = (样本OD值 - 零点校正) / 曲线斜率 × 稀释倍数

分析性能参数

| 项目 | 性能 |

| 检测范围 | 10 - 800 ng/mL |

| 灵敏度 | ≤ 5 ng/mL |

| 特异性 | 不与大鼠IgA/IgG/IgM交叉反应 |

| 批内精密度 | CV ≤ 10% |

| 批间精密度 | CV ≤ 15% |

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