大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒

产品基本信息

检测方法：酶联免疫吸附试验（双抗体夹心法）

检测样本：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等

种属特异性：大鼠（其他种属需确认交叉反应性）

规格：48T/96T（可根据需求选择）

保存条件：2-8℃冷藏，有效期6个月

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法：

微孔板预包被抗大鼠CETP捕获抗体。

加入样本或标准品后，CETP与捕获抗体结合。

洗涤后加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

TMB底物显色，颜色深浅与CETP浓度正相关。

终止反应后，450nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

样本处理要求

血清/血浆：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清；避免反复冻融。

组织匀浆：按重量体积比（如1:9）加入PBS匀浆，离心后取上清。

细胞上清：直接离心去除沉淀后检测。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：每孔加入样本或标准品（建议复孔）。

孵育：37℃温育30-60分钟，彻底洗涤。

酶标抗体孵育：加入HRP标记抗体，重复温育和洗涤。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液，450nm读取OD值。

注意事项

操作规范：试剂盒不可混用组分，避免交叉污染。

加样精度：使用校准加样器，避免气泡或速度不均影响结果。

时间控制：显色时间需严格一致，强阳性样本可能需缩短反应时间。

储存：未使用的板条需密封防潮，避免反复冻融标准品。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，拟合回归方程。

样本浓度需落在标准曲线线性范围内，超出范围需稀释后重测。
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