大鼠凋亡相关因子配体(FASL) ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被抗大鼠FASL捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，通过TMB底物显色（蓝色→黄色）。显色深度与样本中FASL浓度呈正相关，于450nm波长测定OD值并计算浓度。

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃/-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：EDTA或肝素抗凝全血，采集后30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清检测或保存。

组织匀浆：

预冷PBS（0.01M, pH=7.4）冲洗组织，去除血液后称重剪碎。

按1:9（重量体积比）加入PBS（含蛋白酶抑制剂），冰上研磨。

超声破碎或冻融后，5000×g离心5-10分钟，取上清检测。

细胞上清：1000×g离心20分钟，取上清检测或保存。

注意：溶血样本禁用。

试剂盒组成

| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 |

| 微孔酶标板 | 8孔×12条 | 8孔×6条 |

| 标准品 | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 |

| 样本稀释液 | 6mL | 3mL |

需自备器材

酶标仪（450nm）

加样器及枪头（0.5-10μL至200-1000μL）

37℃恒温箱

蒸馏水

操作步骤

标准品梯度稀释，与样本同步加入微孔。

加入HRP标记抗体，37℃温育60分钟，洗涤5次。

每孔加TMB显色液，避光反应15分钟，终止后30分钟内检测。

注意事项

不同批次组分不可混用。

标准品需现配现用，避免反复冻融。

实验前平衡所有组分至室温。

保存条件

试剂盒2-8℃保存，有效期6个月；样本-20℃保存不超过1个月。
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