大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被大鼠FAS/CD95捕获抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和彻底洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色，酸化后呈黄色，其颜色深度与样本中FAS/CD95浓度呈正相关。通过酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），计算样本浓度。

样本要求

血清：全血标本室温静置2小时或4℃过夜后，1000×g离心20分钟，取上清保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

其他样本：血浆、组织匀浆、细胞培养上清等需按标准预处理方法操作，去除颗粒物后分装保存。

试剂盒组成

预包被微孔板

FAS/CD95标准品

HRP标记检测抗体

TMB显色液

终止液

洗涤缓冲液（浓缩）

操作步骤

加样：每孔加入样本或标准品50 μL，随后加入HRP标记抗体50 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃去孔内液体，用洗涤缓冲液注满各孔，静置30秒后甩干，重复5次。

显色：每孔加入TMB底物液100 μL，37℃避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液50 μL，15分钟内测定450 nm OD值。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融标准品。

不同批次试剂组分不可混用。

样本溶血或脂血可能干扰检测结果。

技术参数

灵敏度：≤1.0 pg/mL

检测范围：5–1000 pg/mL

特异性：不与大鼠其他凋亡因子交叉反应。

保存条件：未开封试剂盒4℃保存6个月；开封后按组分要求存储。
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