大鼠Smad1 ELISA试剂盒

试剂盒参数

检测方法： 夹心法酶联免疫吸附试验 (Sandwich ELISA)

保存条件：

试剂盒整体： 2-8°C 保存（切勿冷冻！）。

标准品、检测抗体A、检测抗体B-HRP、底物溶液： 开封后根据说明书建议分装，并按说明冷冻保存（通常-20°C或-80°C）。

其他组分（如包被板、洗涤液、终止液等）： 通常2-8°C保存即可。

预期用途

本试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液等生物样本中的Smad1蛋白浓度。适用于科研实验室研究大鼠TGF-β/BMP信号通路活化状态、骨形成、胚胎发育、免疫调节等相关机制。

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法。预先将抗大鼠Smad1特异性单克隆抗体包被在微孔板上。加入标准品或待测样本，样本中的Smad1蛋白会与包被抗体结合。洗涤去除未结合的成分后，加入生物素标记的抗大鼠Smad1检测抗体（A），形成“包被抗体-Smad1-生物素化抗体”复合物。再次洗涤后，加入辣根过氧化物酶标记的亲和素（抗体B-HRP）。最后加入显色底物（TMB），在HRP酶的催化下产生蓝色产物，加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中Smad1蛋白的浓度呈正相关。在450nm波长（或参考波长570/630nm）下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样本中Smad1蛋白的浓度。

主要技术参数

检测范围： 通常典型范围约为 15.6 pg/mL - 1000 pg/mL (或 0.156 ng/mL - 10 ng/mL)。不同厂家会有差异。

灵敏度： 通常检测下限(LoD)在 1-5 pg/mL 范围内。具体数值见实际试剂盒说明书。

特异性： 能特异性检测大鼠的天然及重组Smad1蛋白。一般与其它大鼠Smad家族成员（如Smad2, Smad3, Smad5, Smad8等）无显著交叉反应。

精密度：

批内精密度： CV < 10%

批间精密度： CV < 15%

回收率： 通常血清、血浆样本的回收率在 85%-115% 之间。

线性稀释： 使用稀释液或特定基质稀释样本，其线性应在试剂盒标明的范围内。

样本要求

样本类型： 大鼠血清、血浆（EDTA、柠檬酸或肝素抗凝）、组织匀浆（用PBS或裂解液稀释）、细胞培养上清、细胞裂解液等。

样本收集与处理：

血清： 室温血液自然凝固30分钟，4°C离心（约1000×g，10-20分钟），小心吸取上清。

血浆： 采集血液至含适当抗凝剂的采血管中，轻轻混匀，4°C离心（根据抗凝剂要求选择离心速度和条件），小心吸取血浆层。注意：肝素抗凝血浆可能影响某些ELISA，需确认试剂盒兼容性。

组织匀浆： 在冰冷PBS中加入蛋白酶抑制剂裂解组织（推荐使用试剂盒配套裂解液或中性PBS），机械匀浆后离心（10000-12000×g，4°C，5-10分钟），取上清。

细胞培养上清： 直接收集上清液，离心去除细胞碎片。

细胞裂解液： 使用含蛋白酶抑制剂的冰冷裂解液裂解细胞，离心（10000-12000×g，4°C，5-10分钟），取上清。

样本储存： 新鲜样本在2-8°C条件下建议24小时内检测。若需长期保存，应分装并于**-80°C或-20°C**冻存（避免反复冻融）。测试前需将样本恢复至室温，并轻轻摇匀。冻存样本可能有沉淀物，检测前需4°C离心（≥5000×g，10分钟）去除沉淀。
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