预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆或其他生物液体中的DDC含量，适用于科研用途，不用于临床诊断。

实验原理

通过纯化的DDC抗体包被微孔板形成固相载体，依次加入样本、生物素化DDC抗体、HRP标记亲和素，经洗涤后以TMB显色。在过氧化物酶催化下，TMB显色强度与样本中DDC浓度呈正相关，通过450 nm波长测定OD值并计算浓度。

试剂盒组成

微孔板：96孔（或48孔）预包被板条。

标准品：冻干粉2瓶（4,000 pg/ml），临用前以稀释液复溶，梯度稀释为8个浓度（62.5–4,000 pg/ml）。

辅助试剂：

酶标试剂（HRP标记物）

样品稀释液、洗涤缓冲液

显色底物（TMB）、终止液

封板膜、密封袋

操作步骤

标准品配制：复溶后室温静置10分钟，涡旋混匀，按需稀释为系列浓度。

加样：每孔加入样本或标准品100 μl，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，重复5次。

加酶标试剂：每孔加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟。

显色：加入TMB避光反应15–30分钟，终止后30分钟内测定OD值。

结果计算

以标准品浓度（对数坐标）与OD值绘制标准曲线，通过回归方程计算样本浓度。

若样本需稀释，最终浓度需乘以稀释倍数。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

标准品现配现用，剩余不可保存。

不同批次试剂不可混用，避免交叉污染。

终止后显色会逐渐衰减，需及时检测。

储存及有效期

未开封试剂盒：2–8℃保存，有效期6个月。

开封后：微孔板需密封防潮，酶标试剂避免光照。

性能参数

灵敏度：≤25 pg/ml

检测范围：62.5–4,000 pg/ml

精密度：板内变异系数<10%，板间<15%

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