产品用途

图

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中红细胞生成素（EPO）的含量，适用于科研用途。

实验原理

采用双抗体夹心法：

固相抗体包被：微孔板预包被纯化的抗人EPO捕获抗体。

抗原-抗体结合：样本中的EPO与固相抗体结合后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：经洗涤后加入底物TMB，在HRP催化下产生蓝色产物，酸性终止液转化为黄色，颜色深度与样本中EPO浓度呈正相关。

定量分析：于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算EPO浓度。

试剂盒组成

48孔配置：微孔板、标准品、检测抗体、TMB显色液、终止液、洗涤缓冲液、封板膜、密封袋、说明书。

96孔配置：组分同上，数量按比例增加。

样本要求

血清/血浆：采集后离心分离，避免溶血或反复冻融。

组织匀浆：按标准方法制备，离心取上清。

保存条件：短期（24小时）可置于2-8℃，长期需-20℃以下保存。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样孵育：每孔加入样本或标准品，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后以洗涤缓冲液洗板5次。

酶标抗体反应：加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB避光显色15分钟，终止液终止反应。

检测：450 nm读取OD值，绘制标准曲线并计算浓度。

注意事项

试剂盒需在有效期内使用，不同批号组分不可混用。

避免反复冻融标准品或样本。

操作时需佩戴防护用具，终止液为酸性腐蚀性液体。

技术参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL（具体以标准曲线为准）。

灵敏度：≤5 pg/mL。

精密度：板内变异系数＜10%，板间＜15%。

储存条件

未开封试剂盒保存于2-8℃，开封后按组分要求存放（如酶标抗体需避光-20℃保存）。

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