产品概述

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用于体外定量检测人血清、血浆、细胞裂解液、唾液、尿液或细胞培养上清中MMP-7的含量。MMP-7是一种依赖锌和钙的内肽酶，参与细胞外基质降解，在胚胎发育、组织再生及病理过程（如癌症、心血管疾病）中发挥重要作用。

检测原理

包被与捕获：微孔板预包被MMP-7特异性多克隆抗体。

样本反应：加入待测样本或标准品，MMP-7与包被抗体结合。

标记抗体结合：加入生物素标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-标记抗体”复合物。

信号放大与显色：加入链霉亲和素-HRP结合物，催化底物TMB显色（蓝色→黄色），颜色深度与MMP-7浓度正相关。

定量分析：450 nm波长测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组分

预包被微孔板：96孔或48孔配置（2-8℃保存）。

标准品：冻干粉或即用型（400 ng/ml），需按说明书稀释。

生物素标记检测抗体：即用型溶液。

HRP标记链霉亲和素：即用型溶液。

TMB底物溶液：避光保存。

终止液（酸性溶液）：用于终止反应。

洗涤缓冲液（PBS/TBS）：浓缩液需稀释后使用。

样本处理与保存

血清：无热原试管采集，3000 rpm离心10分钟，避免溶血。

血浆：EDTA/柠檬酸盐抗凝，3000 rpm离心30分钟。

细胞上清：3000 rpm离心10分钟去除颗粒。

保存：2-8℃可短期保存（≤24小时）；长期需分装冻存于-20℃（避免反复冻融）。

操作步骤

标准品稀释：按梯度稀释至工作浓度（如400 ng/ml→0 ng/ml）。

加样：每孔加入样本或标准品100 μl，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液300 μl/孔，重复3次。

加检测抗体：每孔加生物素标记抗体100 μl，37℃孵育60分钟，洗涤。

加酶结合物：每孔加HRP-链霉亲和素100 μl，37℃孵育30分钟，洗涤。

显色：加TMB底物100 μl/孔，避光反应15分钟。

终止与读数：加终止液50 μl/孔，450 nm测OD值（630 nm参比）。

注意事项

仅限科研：不可用于临床诊断。

试剂保存：未开封试剂2-8℃保存；开封后按标签要求存放。

避免污染：使用一次性吸头，避免交叉污染。

标准曲线：每次实验需重新绘制。

异常值处理：样本浓度超过标准曲线上限时，需适当稀释后复测。

性能参数

检测范围：通常为1.56-100 ng/ml（具体以标准曲线为准）。

灵敏度：≤0.5 ng/ml。

批内/批间差：CV<10%。

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