产品用途

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物体液中肝细胞生长因子（HGF）的浓度，适用于科研用途。

实验原理

采用双抗体夹心法：

固相抗体：微孔板预包被抗人HGF单克隆抗体，捕获样本中的HGF。

酶标抗体：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗或生物素化抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：通过TMB底物显色（蓝色→黄色），OD值与HGF浓度呈正相关，450 nm波长下测定吸光度，标准曲线定量。

试剂盒组成

预包被酶标板：96孔（可拆卸）

标准品：梯度浓度HGF溶液（冻干粉或液体）

酶标抗体工作液：HRP标记抗体（12 mL）

标本稀释液：10×或20×浓缩液（需稀释）

洗涤缓冲液：20×浓缩液（需稀释）

显色底物（TMB）、终止液（酸性溶液）

封板膜、说明书及质检报告

样本处理

血清/血浆：采集后离心去除颗粒物，-20℃保存避免反复冻融。

细胞上清液：离心去除沉淀，稀释至线性范围内。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：标准品/样本加入对应孔（100 μL/孔），37℃孵育。

洗涤：弃液后使用洗涤缓冲液洗板3-5次。

加酶标抗体：37℃孵育后洗涤。

显色与终止：加入TMB避光反应，终止后30分钟内检测OD值。

注意事项

储存条件：未开封试剂盒2-8℃保存，开封后按组分要求存放（部分需-20℃）。

重复性：建议复孔检测，CV值应＜15%。

干扰因素：避免溶血、脂血或反复冻融样本。

计算与结果

以标准品OD值绘制曲线（四参数拟合），计算样本浓度。

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL。

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