预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆或其他生物液体样本中的骨保护素（OPG）含量，适用于体外研究，不可用于临床诊断。

实验原理

双抗体夹心法：

微孔板预包被抗人OPG单克隆抗体，形成固相载体。

样本中的OPG与固相抗体结合后，加入生物素标记的抗人OPG抗体，形成抗体-抗原-生物素化抗体复合物。

通过辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素与生物素结合，加入底物TMB显色。显色强度与样本中OPG浓度呈正相关。

终止反应后，于450 nm波长测定吸光度（OD值），根据标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

96孔酶标板：预包被抗人OPG抗体

标准品（冻干粉）：2瓶（1.2 pmol/瓶），临用前需用样本稀释液复溶并梯度稀释至0.156-10 ng/mL系列浓度。

酶标抗体工作液（HRP标记）：12 mL

生物素化抗体工作液：12 mL

10×样本稀释液：12 mL

20×浓缩洗涤液：50 mL（使用前需稀释）

TMB底物溶液：12 mL

终止液（硫酸溶液）：12 mL

封板膜、密封袋及说明书。

操作步骤

标准品配制：复溶后梯度稀释为7个浓度点（含空白对照）。

加样与孵育：每孔依次加入标准品或样本、生物素化抗体、酶标工作液，37℃孵育后洗涤。

显色与终止：加入TMB避光显色10-15分钟，终止后30分钟内检测OD值。

注意事项

避免反复冻融样本或试剂。

标准品需现配现用，稀释时避免直接于微孔板内操作。

洗涤需彻底，避免交叉污染。

技术参数

检测范围：0.156-10 ng/mL

灵敏度：<0.078 ng/mL

批内/批间变异系数：均<10%。

储存与有效期

未开封试剂盒2-8℃保存有效期为12个月；开封后酶标板需密封防潮，其余组分按标签要求保存。

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