人钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，用于定量检测人血清、血浆、组织匀浆液或细胞上清液中的钙调磷酸酶（CaN）浓度。试剂盒适用于科研用途，严禁用于临床诊断。

检测原理

夹心法ELISA：预包被抗体的微孔板捕获样本中的CaN，依次加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的亲和素，形成“抗体-抗原-抗体-酶”复合物。

显色反应：加入底物TMB（或A/B液）后，在HRP催化下产生颜色变化，终止后呈黄色，其吸光度（OD值）与CaN浓度正相关，通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

微孔酶标板：预包被CaN抗体（96T/48T配置）。

标准品：400 ng/mL（或特定浓度），需按说明书稀释。

检测抗体：生物素标记抗CaN抗体（即用型）。

酶结合物：HRP标记链霉亲和素（即用型）。

洗涤缓冲液：20×浓缩液，需稀释后使用。

底物溶液：TMB（或A/B液）及终止液。

空白对照、封板膜、说明书等。

样本处理

血清/血浆：采集后3000 rpm离心10-30分钟，避免溶血或反复冻融。

组织匀浆：生理盐水匀浆后离心取上清。

保存：分装冻存于-20℃，检测前室温平衡60分钟。

操作步骤

试剂准备：所有组分室温平衡60分钟，洗涤液需溶解结晶并稀释。

加样：标准品及样本各加10-100 μL至微孔，37℃温育60分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，静置30秒，重复3次。

加检测抗体：加入HRP标记物，37℃温育30分钟，再次洗涤。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟，终止后30分钟内检测OD450 nm。

注意事项

储存条件：试剂盒2-8℃保存，有效期6个月。

操作规范：避免交叉污染，加样需精准，温育时间严格控制。

仪器要求：使用450 nm酶标仪及高精度移液器（0.5-1000 μL范围）。

技术参数

检测范围：0.01 pg/mL至400 ng/mL（具体以标准曲线为准）。

精密度：批内变异系数（CV）<10%，批间CV<15%。

特异性：与人源CaN特异性结合，无交叉反应。
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