人钙调素(CAM)ELISA试剂盒

产品基本信息

适用范围：科研用途，禁止用于临床诊断。

检测样本：人血清、血浆、尿液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

保存条件：2-8℃保存，有效期6个月。

实验原理

采用双抗体夹心法：

微孔板预包被抗人CAM抗体，形成固相抗体。

加入样本或标准品后，CAM与固相抗体结合。

加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

洗涤后加入TMB底物显色，颜色深浅与CAM浓度正相关。

450 nm波长测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

标准品（不同浓度）

样本稀释液

HRP标记检测抗体

洗涤液（20×浓缩）

TMB显色液

终止液（2N H₂SO₄）

封板膜、说明书

操作步骤

样本准备：离心去除沉淀，避免反复冻融。

试剂平衡：室温平衡20分钟，剩余板条4℃密封保存。

加样：

标准品孔：50 μL不同浓度标准品。

样本孔：10 μL样本 + 40 μL稀释液（空白孔不加）。

孵育：每孔加入100 μL HRP标记抗体，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液体，洗涤液洗板5次，拍干。

显色：每孔加TMB 90 μL，避光反应15-30分钟。

终止：加50 μL终止液，颜色由蓝变黄。

检测：450 nm读取OD值（参考630 nm校正）。

注意事项

避免交叉污染，使用一次性吸头。

严格控制孵育时间和温度。

洗涤需彻底，避免残留影响结果。

显色后30分钟内完成检测。

技术参数

灵敏度：通常<0.1 ng/mL（具体以说明为准）。

检测范围：1.5-100 ng/mL（标准曲线范围可调）。

精密度：板内变异系数<10%，板间<15%。
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