检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将样本与标准品加入预包被抗体的微孔板中，经生物素标记抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素依次孵育，通过底物TMB显色。显色强度与样本中TSA/TSTA浓度呈正相关，450nm波长下测定吸光度（OD值）并计算浓度。

产品用途
定量检测人血清、血浆或其他液体样本中肿瘤特异性抗原（TSA/TSTA）含量，适用于肺癌相关研究。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔或48孔（可拆卸）。

标准品（80ng/ml）：1瓶（0.6ml/96T或0.3ml/48T），需按说明书稀释。

生物素标记抗体：即用型，1瓶（6ml/96T或3ml/48T）。

HRP标记亲和素：即用型，1瓶（10ml/96T或5ml/48T）。

底物溶液（TMB A/B）：避光保存，显色用。

终止液：酸性溶液，终止反应。

洗涤缓冲液：20×浓缩液，需稀释后使用。

说明书及质检报告。

操作步骤

样本准备：血清/血浆需离心去除颗粒，避免反复冻融。

加样：

空白孔：加样品稀释液100μl。

标准孔：依次加入梯度稀释的标准品100μl。

样本孔：加入待测样本100μl。

孵育：37℃避光反应120分钟，洗涤3次。

加生物素抗体：每孔100μl，37℃孵育60分钟，洗涤3次。

加HRP亲和素：每孔100μl，37℃孵育60分钟，洗涤5次。

显色：每孔加TMB底物90μl，37℃避光显色15-30分钟（显蓝色梯度）。

终止：每孔加终止液50μl，颜色转为黄色。

检测：450nm波长下读取OD值，绘制标准曲线计算浓度。

注意事项

试剂盒需2-8℃保存，避免冷冻或强光照射。

不同批次试剂不可混用。

样本浓度过高时需稀释后复测。

操作时需佩戴防护用具，避免接触终止液等腐蚀性液体。

技术参数

检测范围：1.5-80ng/ml（具体以实际标准曲线为准）。

灵敏度：<0.5ng/ml。

重复性：板内/板间变异系数（CV）<10%。

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