人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒

预期用途

用于体外定量检测人血清或血浆（柠檬酸盐/EDTA/肝素抗凝）中低浓度范围的超敏 C 反应蛋白 (hs-CRP)。

应用范围： 科学研究、临床前研究。

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (Sandwich ELISA) 进行定量检测。

包被： 酶标板微孔预先包被有抗人hs-CRP单克隆抗体（捕获抗体）。

加样与孵育： 加入样本（血清/血浆）和标准品。样本中的hs-CRP与微孔板上的捕获抗体特异性结合。

洗板： 去除未结合的物质。

加生物素化抗体： 加入生物素标记的抗人hs-CRP抗体（检测抗体），与结合在捕获抗体上的hs-CRP形成“夹心”复合物。

洗板： 再次洗去未结合的物质。

加酶结合物： 加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素(Streptavidin)。链霉亲和素会与生物素特异性高亲和力结合。

洗板： 洗去未结合的酶结合物。

显色： 加入显色底物液（TMB）。HRP催化TMB发生颜色反应，产生蓝色产物。

终止反应： 加入终止液（通常是酸性溶液），蓝色变为黄色。

读数： 在酶标仪上于450 nm（主波长），参考630 nm（副波长）处测量各孔的吸光度(OD值)。

样本的OD值与其中的hs-CRP浓度成正比。 通过绘制标准曲线（以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标），即可计算出样本中hs-CRP的浓度。

储存条件

未开封试剂盒： 保存于 2-8°C。在包装盒标明的有效期内使用。酶标板需保持干燥。

开封后：

标准品（冻干粉）： 复溶后应分装，≤ -20°C 冷冻保存。避免反复冻融。

标准品（液体）： 2-8°C 保存（按说明书指示）。

生物素化抗体、酶结合物浓缩液： 2-8°C 或 ≤ -20°C 保存（按说明书指示）。

稀释后的抗体、酶结合物、显色底物： 即配即用。

洗涤缓冲液浓缩液： 2-8°C 保存。稀释后可在室温存放数天。

样本稀释液、终止液： 2-8°C 保存。

已使用的酶标板条： 放回含干燥剂的铝箔袋中密封，2-8°C 保存。

样本采集与处理

样本类型： 人血清（推荐）或血浆（柠檬酸盐、EDTA或肝素抗凝）。避免溶血、脂血或浑浊样本。

采集： 使用标准静脉穿刺术采集血液。

血清： 待血液完全凝固后（室温或4°C），1500×g 离心10-15分钟，立即分离血清。

血浆： 将全血收集在含抗凝剂的管中，轻轻混匀后立即离心（1500×g, 10-15分钟），分离血浆。确保抗凝剂比例正确。
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