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人催产素(OT)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 人催产素ELISA试剂盒 Human oxytocin, OT Elisa Kit 产品介绍
产品概述
检测目标:人、大鼠、小鼠等哺乳动物样本中的催产素 检测方法:双抗体夹心法ELISA 样本类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞上清、组织匀浆、脑脊液、尿液 灵敏度:≤ 5 pg/mL 检测范围:10–2000 pg/mL 种属交叉反应:人、大鼠、小鼠 >95% 检测时间:约 4小时(含孵育步骤)
实验原理
采用高亲和力抗人OT单克隆抗体预包被微孔板,加入样本和生物素化检测抗体形成复合物;再通过辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素催化底物显色。吸光度(OD值)与OT浓度呈正相关。 试剂盒组分 | 组分 | 规格 | 数量 | 存储条件 | | 预包被抗体微孔板 | 96孔 | 1块 | 2–8℃ | | OT标准品冻干粉 | 10 ng/瓶 | 2瓶 | -20℃ | | 生物素化检测抗体 | 120 μL | 1管 | -20℃ | | HRP-链霉亲和素 | 120 μL | 1管 | 2–8℃ | | 显色底物TMB | 12 mL | 1瓶 | 2–8℃避光 | | 终止液(2M H₂SO₄) | 12 mL | 1瓶 | 室温 | | 20×洗涤缓冲液 | 50 mL | 1瓶 | 2–8℃ | | 样本稀释液 | 15 mL | 1瓶 | 2–8℃ | 样本制备指南 | 样本类型 | 处理要求 | 推荐稀释倍数 | | 血清/血浆 | 避免反复冻融,离心去除沉淀 | 1:1~1:5(稀释液) | | 细胞上清 | 4℃ 10,000×g 离心5分钟 | 无需稀释或1:2稀释 | | 组织匀浆 | PBS匀浆后离心取上清 | 1:10(稀释液) | | 脑脊液 | 直接检测(避免溶血) | 1:1 | | 尿液 | 离心后取上清,调整pH至7.0 | 1:2~1:10 | 避免使用含NaN₃的缓冲液(会抑制HRP活性)。 操作流程
标准品复溶:用1 mL样本稀释液溶解冻干粉(配成10 ng/mL母液),梯度稀释至5个浓度点(2000、500、100、25、5 pg/mL)。 加样: 标准品/样本各100 μL/孔(复孔) 空白孔:稀释液 孵育:37℃ 90分钟 → 洗板4次(300 μL/孔洗涤液)。 加检测抗体:每孔加100 μL生物素化抗体 → 37℃ 60分钟 → 洗板4次。 加酶结合物:每孔100 μL HRP-链霉亲和素 → 37℃ 30分钟 → 洗板4次。 显色:每孔90 μL TMB → 避光室温15分钟(出现蓝色)。 终止:每孔90 μL终止液(变黄色)。 检测:酶标仪450 nm读数(参比波长570 nm)。 数据分析 计算空白孔平均OD值并扣除。 以标准品浓度(X轴)vs OD值(Y轴)绘制标准曲线(4参数拟合Logistic曲线)。 通过回归方程计算样本OT浓度(pg/mL)。 换算公式:实际浓度 = 测量值 × 稀释倍数。 性能参数
| 指标 | 参数值 | | 批内精密度 | CV < 8% | | 批间精密度 | CV < 12% | | 回收率 | 85%-115% | | 特异性 | 与加压素(AVP)交叉性 <0.01% | 储存与有效期 未拆封试剂盒:-20℃保存,有效期12个月(避免反复冻融)。 已包被微孔板:2-8℃干燥存放,拆封后1月内用完。 公司正在出售的产品
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上海谷研实业有限公司
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