大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒

预期用途

定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液或组织匀浆中的INHBP浓度。适用于科研用途，不用于临床诊断。

试剂盒组成

| 组分 | 规格 | 保存条件 |

| 预包被抗体微孔板 | 96孔板（可拆卸） | 2-8°C |

| INHBP标准品 | 冻干粉或溶液 | -20°C（复溶后2-8°C） |

| 样品稀释液 | 30ml | 2-8°C |

| 检测抗体（生物素化） | 120μl | 2-8°C |

| HRP-链霉亲和素 | 120μl | 2-8°C |

| TMB显色底物 | 10ml | 避光2-8°C |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 10ml | 室温 |

| 洗涤缓冲液（20X浓缩液）| 50ml | 室温（稀释后2-8°C） |

样本要求

血清/血浆：EDTA或肝素抗凝，离心后取上清，-80°C保存避免反复冻融。

细胞上清：离心去除颗粒物。

组织样本：PBS匀浆后离心取上清。

稀释建议：根据预实验结果调整稀释比例（通常建议1:5~1:10）。
操作步骤

标准品复溶：用标准品稀释液配制系列浓度（如：0, 15.6, 31.2, 62.5, 125, 250, 500, 1000 pg/mL）。

加样：100μl标准品/样品加入预包被孔，37°C孵育2小时。

洗涤：洗板液清洗3次。

加检测抗体：加生物素化抗体，37°C孵育1小时。

加酶结合物：加HRP-链霉亲和素，37°C避光孵育30分钟。

显色：加TMB底物避光显色10-15分钟。

终止反应：加50μl终止液，颜色由蓝转黄。

检测：立即在450nm波长测OD值（参考波长630nm）。

结果计算

绘制标准曲线：以标准品浓度为X轴（对数坐标），OD450值为Y轴（线性坐标）。

拟合回归方程（如四参数逻辑曲线）。

根据样本OD值计算INHBP浓度，乘以稀释倍数。

性能参数

| 指标 | 典型值 |

| 检测范围 | 15.6 - 1000 pg/mL |

| 最低检测限（LOD）| ≤5 pg/mL |

| 精密度（CV%） | 板内/板间 <10% |

| 回收率 | 85%-115% |

| 交叉反应 | 大鼠INHBA/INHBB <0.1% |
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