大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞上清液或组织匀浆中的乙酰胆碱酯酶（AChE）含量。采用双抗体夹心法原理，具有高灵敏度和特异性，检测范围为40–1200 nmol/L，适用于科研用途。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠AChE抗体。

抗原结合：加入样本或标准品后，AChE与固相抗体结合。

酶标抗体孵育：HRP标记的二抗与AChE形成复合物。

显色反应：TMB底物在HRP催化下显蓝色，终止液转化为黄色，吸光度（OD值）与AChE浓度正相关。

检测：酶标仪450 nm波长测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板（96T或48T）

AChE标准品（浓度梯度）

HRP标记抗体

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液）

封板膜、说明书

样本处理与保存

血清：全血室温静置10–20分钟，2000–3000 rpm离心20分钟，取上清。

血浆：EDTA/肝素抗凝，3000 rpm离心30分钟。

细胞上清/组织匀浆：3000 rpm离心10分钟去除杂质。

保存：分装后-20℃冻存，避免反复冻融。检测前室温解冻并充分混匀。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：每孔加入样本或标准品50 μL，37℃孵育30分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，重复5次。

酶标抗体：每孔加HRP抗体50 μL，37℃孵育30分钟。

显色：加TMB 50 μL，避光反应15分钟，终止后30分钟内检测。

注意事项

避免试剂接触金属离子或氧化剂。

显色时间可根据颜色深浅调整（10–20分钟）。

样本浑浊需离心或过滤后检测。

开封板条需密封干燥保存。

结果计算

以标准品OD值绘制曲线，拟合方程计算样本浓度。

技术参数

灵敏度：≤5 nmol/L

批内变异系数：<10%

批间变异系数：<15%

有效期与储存

未开封试剂盒：2–8℃保存，有效期12个月。

开封后：微孔板需密封防潮，其他组分按标签保存。
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