实验原理

试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。预先包被抗P-PKC抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，加入底物TMB显色。显色深度与样本中P-PKC浓度呈正相关，通过450nm波长测定OD值并计算浓度。

检测方法：双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）

适用样本：大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清，-20℃/-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：使用EDTA或肝素抗凝管收集，离心后取上清，保存条件同血清。

组织/细胞上清：匀浆后离心取上清，建议分装保存。

操作注意事项

试剂准备：

使用前室温平衡15-30分钟。

浓洗涤液若有结晶，37℃水浴助溶，不影响效果。

加样规范：

使用校准后的加样器，单次加样时间控制在5分钟内；样本量大时推荐使用排枪。

每批次实验需同步制作标准曲线，建议做复孔。

温育与洗涤：

温育时需覆膜避光，避免蒸发。

洗涤需彻底，防止非特异性结合。

其他：

封板膜仅限单次使用，避免交叉污染。

底物需避光保存，显色后及时检测。

不同批号组分禁止混用。

保存条件及有效期

未开封试剂盒：4℃保存，有效期6个月。

开封后：按组分要求分装保存（如标准品-20℃冻存）。

结果判读

必须使用酶标仪读取450nm吸光度值，手动比色可能引入误差。

数据计算需以标准曲线为基准，建议使用专业分析软件。

公司正在出售的产品