人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。微孔板预包被抗人IL-11抗体，样本中IL-11与抗体结合后，加入酶标二抗形成复合物，通过底物显色反应测定OD值，计算IL-11浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

标准品（冻干或液体）：6浓度梯度（0-XXX pg/mL）

样本稀释液

HRP标记检测抗体

洗涤液（20×浓缩）

底物A/B

终止液

封板膜

操作步骤

平衡与准备

试剂盒室温平衡20分钟，标准品复溶后分装保存于-20℃。

加样

标准品孔：加入50μL不同浓度标准品。

样本孔：加入10μL样本+40μL稀释液（或直接加50μL已稀释样本）。

空白孔：仅加稀释液。

孵育

每孔加入100μL酶标抗体（空白孔除外），37℃孵育60分钟。

洗涤

弃液后拍干，每孔加满洗涤液静置1分钟，重复5次。

显色

加入底物A/B各50μL，37℃避光反应15分钟。

终止与检测

加入50μL终止液，15分钟内于450nm波长读取OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。

注意事项

样本处理：血清/血浆需离心去除杂质，避免反复冻融。

实验条件：室温波动需控制在20-25℃，洗涤需彻底避免假阳性。

安全防护：终止液含硫酸，需佩戴手套操作。

性能参数

灵敏度：≤5 pg/mL

检测范围：15.6-1000 pg/mL

精密度：板内/板间CV＜10%
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