人白介素27(IL-27)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体夹心法，通过包被抗IL-27抗体捕获样本中的目标蛋白，再结合酶标二抗与底物显色，定量检测人血清、血浆或细胞培养上清中的IL-27浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

IL-27标准品（梯度浓度）

样本稀释液

HRP标记检测抗体

洗涤缓冲液（10×浓缩液）

底物A/B

终止液

封板膜

操作步骤

样本准备：

血清/血浆需离心去除颗粒物，细胞上清需过滤澄清。

样本建议分装保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

试剂平衡：

所有组分使用前需室温平衡20-30分钟。

加样与孵育：

标准品孔：加入50μL不同浓度标准品。

样本孔：先加10μL待测样本，再加40μL稀释液（空白孔仅加稀释液）。

每孔加入100μL HRP标记抗体，37℃孵育60分钟。

洗涤：

弃去液体，每孔加满洗涤液，静置1分钟后弃去，重复5次。

显色与终止：

每孔加入底物A/B各50μL，37℃避光反应15分钟。

加入50μL终止液，颜色由蓝变黄。

检测：

450nm波长下读取OD值，根据标准曲线计算样本浓度。

注意事项

不同批次试剂不可混用。

洗涤需彻底，避免交叉污染。

显色时间需严格控制，终止后15分钟内完成检测。

技术参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL。

灵敏度：<5 pg/mL。

精密度：板内变异系数<10%，板间<15%。

适用仪器

酶标仪（450nm滤光片）。
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