产品用途

本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用于定量检测小鼠血清、血浆及相关液体样本中血管舒缓激肽（BK）的含量。

检测原理

包被抗体：微孔板预包被抗小鼠BK抗体。

抗原结合：样本中的BK与固相抗体结合，形成抗原-抗体复合物。

酶标抗体结合：加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB，在HRP催化下显色（蓝色→黄色），颜色深度与BK浓度正相关。

定量分析：450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

| 组分 | 96孔配置 | 48孔配置 |

| 酶标包被板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 |

| 标准品（200ng/mL） | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 |

| 样本稀释液 | 6mL | 3mL |

| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL |

| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL |

| 底物液（TMB） | 6mL | 3mL |

| 终止液 | 6mL | 3mL |

| 封板膜、说明书等 | 1份 | 1份 |

注：标准品需用稀释液依次稀释为200、100、50、25、12.5、6.25ng/mL系列浓度。

需自备器材

37℃恒温箱

酶标仪（450nm滤光片）

精密移液器及一次性吸头

蒸馏水、吸水纸、计时器

操作步骤

复温：试剂盒室温平衡30分钟。

配液：20×洗涤缓冲液按1:19用蒸馏水稀释。

加样：

标准品孔：加入50μL系列浓度标准品。

样本孔：先加10μL样本，再加40μL稀释液（5倍稀释）。

空白孔：不加样。

孵育：37℃反应30分钟，洗涤5次。

加酶标抗体：每孔50μL，37℃孵育30分钟，洗涤5次。

显色：每孔加TMB底物90μL，避光反应15分钟。

终止：每孔加50μL终止液，立即测定OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。

注意事项

保存条件：未开封试剂盒2-8℃保存，有效期6个月；复温后未用完的板条需密封干燥保存。

样本处理：避免反复冻融，溶血或高脂样本可能影响结果。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断或其他用途。

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