大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒

预期用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等样本中的Bcl-2相关X蛋白 (BAX) 浓度。

适用于科学研究 (Research Use Only, RUO)，不用于临床诊断、治疗或预后评估。

检测原理

双抗体夹心酶联免疫吸附法 (Sandwich ELISA)。

在微孔板上预包被了抗大鼠BAX单克隆抗体 (Capture Antibody)。

加入样本或标准品，样本中的大鼠BAX蛋白与预包被的捕获抗体结合。

洗涤去除未结合物质。

加入生物素标记的抗大鼠BAX检测抗体 (Detection Antibody - Biotinylated)，该抗体与BAX蛋白的不同表位结合，形成“捕获抗体-BAX-检测抗体”复合物。

洗涤去除未结合的检测抗体。

加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (Streptavidin-HRP)，链霉亲和素与生物素特异性结合。

洗涤去除未结合的链霉亲和素-HRP。

加入显色底物溶液 (TMB Substrate Solution)，HRP催化底物发生显色反应，产生蓝色产物。

加入终止液 (Stop Solution) 终止反应，颜色由蓝色变为黄色。

在酶标仪上读取450 nm波长下的光密度值 (OD值)。

根据标准品浓度及其对应的OD值绘制标准曲线。

通过标准曲线计算样本中大鼠BAX的浓度。

试剂盒组分

预包被微孔板 (Pre-Coated Microplate)： 96孔板（通常为8孔×12条），孔内预包被抗大鼠BAX捕获抗体。密封袋包装。

标准品 (Standard)： 重组大鼠BAX蛋白冻干粉或高浓度溶液（如1-2管）。需按说明书用标准品稀释液 (Standard Diluent) 进行系列倍比稀释（通常6-7个浓度点，如0, 15.6, 31.2, 62.5, 125, 250, 500, 1000 pg/mL 或类似范围）。具体浓度范围请参照实际说明书。

检测抗体 (Detection Antibody)： 生物素标记的抗大鼠BAX抗体浓缩液（1管）。需按说明书用检测抗体稀释液 (Detection Antibody Diluent) 稀释后使用。

链霉亲和素-HRP (SA-HRP)： 浓缩液（1管）。需按说明书用SA-HRP稀释液 (SA-HRP Diluent) 稀释后使用。

显色底物 (TMB Substrate Solution)： 即用型溶液（1瓶），避光保存。

终止液 (Stop Solution)： 通常为酸性溶液（如1M H₂SO₄或2M H₂SO₄）（1瓶）。

20X 洗涤缓冲液浓缩液 (20X Wash Buffer Concentrate)： 1瓶。使用前需用蒸馏水或去离子水稀释20倍（例如，1份浓缩液 + 19份水）配制成工作洗涤液。

样本/标准品稀释液 (Sample/Standard Diluent)： 用于稀释标准品和某些类型样本（如高浓度样本）的缓冲液（1瓶）。

封板膜 (Plate Sealer)： 用于孵育过程中密封微孔板（数张）。

说明书 (Product Manual/Instruction for Use)： 包含详细操作步骤、注意事项、组分表、标准曲线示例等。

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