大鼠B因子(BF)ELISA试剂盒

产品概述

大鼠B因子(BF)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用于定量检测大鼠血清或血浆样本中的B因子浓度。B因子是补体旁路活化途径的关键成分，分子量约95 kDa，主要由肝脏和巨噬细胞合成。本试剂盒具有高灵敏度和特异性，适用于科研实验中的定量分析。

检测原理

包被：微孔板预包被大鼠B因子捕获抗体。

反应：依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育后彻底洗涤。

显色：加入底物TMB，在过氧化物酶催化下生成蓝色产物，酸性终止液终止反应后转为黄色。

检测：在450 nm波长下测定吸光度（OD值），样本浓度与OD值呈正相关，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

标准品（冻干粉或液体）

HRP标记检测抗体

TMB显色液

终止液

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

封板膜

样本要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃/-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃离心（1000×g，15分钟），取上清检测或冻存。

推荐体积：50–100 μL/孔（具体以实验设计为准）。

操作步骤

试剂准备：将所有组分平衡至室温（20–25℃），配制洗涤缓冲液。

加样：加入标准品和样本，每孔50 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后加入洗涤液，静置30秒后拍干，重复5次。

加检测抗体：每孔加入HRP标记抗体50 μL，37℃孵育30分钟，再次洗涤。

显色：加入TMB底物100 μL，避光反应10–15分钟（若显色过深需提前终止）。

终止与读数：加入终止液50 μL，30分钟内于450 nm测定OD值。

注意事项

反应控制：显色阶段需定时观察（如每10分钟），避免过度反应影响读数。

有效期：未开封试剂盒6个月（2–8℃避光保存），开封后按说明书要求使用。

重复性：建议每个样本设2–3个复孔，确保数据可靠性。

技术参数

检测范围：参考标准曲线（通常为0.5–100 ng/mL）。

灵敏度：≤0.1 ng/mL。

批内/批间差：CV < 10%。

应用范围

适用于免疫学、病理机制研究及药物开发等领域的B因子水平检测。
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