大鼠c-fos ELISA试剂盒

实验原理

采用双抗体夹心法：

微孔板预包被大鼠c-fos特异性抗体；

样本中的c-fos与固相抗体结合后，加入HRP标记的二抗形成复合物；

TMB显色，颜色深度与c-fos浓度正相关，450 nm波长测定OD值。

试剂盒组分

预包被微孔板（12孔×8条）

c-fos标准品（960 pg/mL）及稀释液

HRP酶标试剂、显色液（A/B）、终止液

30×浓缩洗涤液（使用前需稀释）

说明书、封板膜、密封袋

操作步骤

样本准备：采集后尽快提取，-20℃保存避免反复冻融；

标准曲线：稀释标准品至梯度浓度（480–20 pg/mL），建议复孔检测；

加样与孵育：每孔加样100 μL，37℃孵育60分钟；

洗涤：使用稀释后洗涤液彻底清洗5次；

显色与终止：加入TMB避光反应15分钟，终止后30分钟内读数。

注意事项

储存条件：4℃保存有效期内使用，显色液需避光；

操作规范：

试剂平衡至室温后使用，结晶析出的洗涤液可37℃助溶；

加样时间控制在5分钟内，推荐使用排枪提高效率；

质量控制：

每次实验需同步绘制标准曲线；

不同批号试剂禁止混用。

结果计算

以标准品OD值拟合曲线，计算样本浓度。
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