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人白介素1β转换酶(ICE)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 人白介素1β转换酶ELISA试剂盒 Human Interleukin 1βconverting enzyme, ICE Elisa Kit 产品介绍
人白介素1β转换酶(ICE)ELISA试剂盒 产品基本信息
检测方法:双抗体夹心法/竞争法 检测范围:15.6 pg/mL–1,000 pg/mL 适用样本:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆等生物样本 用途:仅供科研使用,不适用于临床诊断。 实验原理
试剂盒基于酶联免疫吸附试验(ELISA)原理: 包被:微孔板预包被抗ICE抗体,形成固相载体。 结合反应:加入样本或标准品后,目标蛋白(ICE)与固相抗体结合;随后加入生物素化检测抗体及HRP标记的亲和素,形成复合物。 显色:加入底物TMB,在过氧化物酶催化下显蓝色,酸性终止液作用后转为黄色。 检测:450 nm波长下测定吸光度(OD值),浓度与OD值呈正相关。 操作步骤
样本准备: 样本需平衡至室温,避免反复冻融。高浓度样本需稀释至检测范围内。 加样与温育: 设空白孔、标准孔及样本孔,每孔加样100 μL,37℃温育2小时。 洗涤: 弃液体,洗板3次(每次浸泡1–2分钟),拍干。 检测抗体孵育: 加入检测抗体工作液100 μL,37℃温育1小时,重复洗涤步骤。 显色与终止: 加底物TMB 90 μL,避光反应15–30分钟(显色梯度明显时终止)。 加入终止液50 μL,立即测定OD值。 注意事项
试剂保存:未开封试剂盒需2–8℃保存,避免反复冻融。 实验条件:所有试剂及样本需室温平衡后使用,避免气泡干扰。 标准品:每次实验需使用新鲜配制标准曲线。 洗涤:彻底洗涤可降低背景干扰,拍干时避免交叉污染。 结果计算 以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标,拟合标准曲线,通过样本OD值计算ICE浓度。 产品性能参数
灵敏度:≤5 pg/mL 特异性:与类似蛋白无交叉反应。 重复性:板内、板间变异系数均<10%。
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上海谷研实业有限公司
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