人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒

产品参数

检测对象: 人血清、血浆或细胞培养上清液中的 IL-12/P70异源二聚体

检测原理: 双抗体夹心法（Sandwich ELISA）

检测范围: 通常为 15.6~1000 pg/mL

灵敏度: ≤5 pg/mL（最低检测限）

样本体积: 100 μL（稀释后）

检测时间: 约 3~4小时（操作时间，不含孵育）

核心组分清单

| 组分 | 规格（96孔） | 保存条件 |

| 预包被抗人IL-12抗体微孔板 | 96孔（可拆） | 2~8℃ (干燥) |

| IL-12标准品 | 冻干粉或液体，2管 | -20℃/-80℃ |

| 检测抗体（生物素标记） | 1瓶（120 μL） | 2~8℃ |

| Streptavidin-HRP（酶标物）| 1瓶（120 μL） | 2~8℃ (避光) |

| 显色底物（TMB） | 1瓶（11 mL） | 2~8℃ (避光) |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 1瓶（12 mL） | 室温 |

| 洗涤缓冲液（30×浓缩液） | 1瓶（20 mL） | 2~8℃ |

| 封板膜 | 4张 | 室温 |

样本要求

| 样本类型 | 处理方式 | 推荐保存条件 |

| 血清 | 直接采集至分离管，凝固后离心取上层血清 | -20℃/-80℃（≤24h内检测可2~8℃）|

| 血浆 | EDTA/肝素抗凝，离心去除血细胞 | 避免反复冻融 |

| 细胞上清 | 离心去除沉淀，0.22 μm过滤 | 分装冻存于-80℃ |

重要提示: 样本避免溶血、脂血或反复冻融，否则影响准确性。

操作流程

标准品/样本稀释: 用样本稀释液梯度稀释标准品（如0, 31.2, 62.5, 125, 250, 500, 1000 pg/mL），待测样本建议1:2预稀释。

加样: 100 μL/孔加入标准品/样本，37℃孵育90分钟。

洗板: 弃液体，用洗涤液（1×PBS+0.05% Tween 20）洗4次。

加检测抗体: 100 μL/孔，37℃孵育60分钟，洗板。

加酶标物: 100 μL/孔，37℃孵育30分钟，洗板。

显色: 加TMB底物90 μL/孔，避光37℃孵育15~20分钟。

终止: 加终止液50 μL/孔，立即测定OD450nm（参考波长570/630nm）。

结果计算

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标（Log值），OD值为纵坐标。

样本浓度通过标准曲线拟合方程（四参数/直线回归）计算，乘以稀释倍数。

示例:

y = (A - D) / (1 + (x/C)^B) + D  （四参数方程）

性能参数

| 指标 | 典型值 |

| 精密度 | 批内CV <8%，批间CV <10% |

| 回收率 | 85%~115%（添加标准品验证）|

| 特异性 | 不与人IL-23、IL-27交叉反应 |

| 线性稀释 | R² ≥0.99（6.3~400 pg/mL） |

注意事项

试剂盒需平衡至室温（25℃）后再使用

避免接触终止液（强酸），操作时戴手套

显色时间需精确控制，避免过度反应

仅限科研使用，不用于临床诊断
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