人8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆、尿液或组织样本中8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的含量。8-OHdG是DNA氧化损伤的重要标志物，广泛应用于氧化应激、衰老及疾病机制研究。

检测原理

采用双抗体夹心法或竞争法：

夹心法：预包被抗体捕获样本中的8-OHdG，与酶标抗体结合后形成复合物，通过TMB显色反应测定吸光度（OD值），浓度与颜色深度呈正相关。

竞争法：样本中的8-OHdG与标记抗原竞争结合固相抗体，OD值与浓度呈负相关。

试剂盒组成

标准品：梯度浓度（如0–4000 pg/mL或0–200 ng/L），需按说明书稀释。

预包被微孔板：96孔或48孔规格，含抗8-OHdG抗体。

酶标试剂：HRP标记抗体，避光保存。

显色液：TMB底物（A液与B液需等体积混合）。

终止液：终止反应。

浓缩洗涤液：20–30倍浓缩，需稀释后使用。

样品稀释液：用于样本预处理。

样本处理

血清/血浆：室温凝固后离心（2000–3000 rpm，20分钟），取上清。

尿液：离心后取上清，避免沉淀。

组织/细胞：按文献方法提取DNA，避免反复冻融。

注意：样本中不可含NaN3，以免抑制HRP活性。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：依次加入样本、标准品及酶标试剂，37℃温育。

洗涤：彻底洗涤后拍干。

显色：加入TMB避光反应，显色时间需严格控制（通常15–30分钟）。

终止：加入终止液后颜色转为黄色。

检测：450 nm波长测定OD值。

结果计算

以标准品OD值绘制标准曲线，通过回归方程计算样本浓度。

注意事项

显色控制：时间不足导致结果偏低，过长增加非特异性显色。

洗涤关键：避免交叉污染，拍干后及时更换吸水纸。

保存条件：未开封试剂盒2–8℃保存（部分组分需-20℃），开封后酶标板需密封防潮。

有效期：通常6–12个月，具体以标签为准。

技术参数

检测范围：49.38–4000 pg/mL。

最低检测限：≤20 pg/mL。

精密度：批内变异系数（CV）<10%，批间CV<15%。
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