人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆、细胞上清及相关液体样本中人8异前列腺素（8-iso-PG）的含量。

实验原理

试剂盒通过预包被人8异前列腺素（8-iso-PG）捕获抗体的微孔板，依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色，酸化后变为黄色，其颜色深度与样本中8-iso-PG浓度呈正相关。最终在450 nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板（96T/48T）

标准品：浓度梯度为800、400、200、100、50、25 pg/mL。

检测抗体：HRP标记。

样本稀释液：用于高浓度样本稀释。

浓缩洗涤液（20×）：使用前需稀释至工作浓度（20 mL稀释至400 mL）。

TMB显色液、终止液等。

样本要求

样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞上清等。

样本处理：

直接取50 μL上样（正常浓度范围内）。

若浓度超过标准品最大值（800 pg/mL），需用样本稀释液适当稀释后检测。

操作步骤

试剂准备：

提前20分钟将试剂盒从2-8℃取出，平衡至室温。

浓缩洗涤液若有结晶，需室温轻摇至溶解后稀释使用。

加样与温育：

依次加入标准品、样本及检测抗体，37℃温育60分钟。

洗涤：使用稀释后的洗涤液彻底清洗微孔板5次。

显色与终止：加入TMB显色15分钟，后加终止液。

检测：450 nm波长下读取OD值，绘制标准曲线计算浓度。

注意事项

有效期：6个月（2-8℃保存）。

仅限研究使用：不适用于临床诊断。

质量控制：建议每次实验均设置标准品及空白对照。

高值样本：需稀释后复测以确保准确性。

技术参数

检测范围：25–800 pg/mL。

灵敏度：<10 pg/mL。

批内/批间变异系数：≤10%。
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